Байланыс телефондары:
(727) 261-00-25
7(727) 272-55-61
» » Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени

Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени

19 июль 2018, Четверг
803
0
Номер инновационного патента: 27086
Опубликовано: 14.06.2013
Авторы: Рамазанов Манас Ембергенович, Нерсесов Александр Витальевич, Сейсембаев Манас Ахметжарович, Токсанбаев Данияр Сапарович, Эгучи Сусуму, Енин Евгений Альбертович, Арзыкулов Жеткерген Анесович, Садыков Нариман Камильевич

Формула / Реферат

Изобретение отностится к медицине, а именно к трансплантации органов и тканей и предназначено для диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени.
Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени включает взятие в послеоперационном периоде пункционного толстоигольного биоптата аллотраисплантированной печени и проведение морфологического исследования срезов биоптатов печени и при обнаружении триады морфологических признаков, включающих воспалительную инфильтрацию по ходу портальных трактов, повреждение желчных протоков и эндотелиит (воспаление вен) диагностирование острого отторжения аллотрансплантата, при этом взятие пункционного толстоигольного биоптата аллотраисплантированной печени осуществляют на 7 сутки после трансплантации и для морфологического исследования используют полутонкие срезы биоптата печени пол щи ной 1 мкм.
Морфологическое исследование полутонких срезов (толщина 1 мкм) для диагностики острого отторжения аллотранспланта способствую более четкому и детальному исследованию биоптата печени и более правильной интерпретации исследуемых изменений для более четкой постановки диагноза острого отторжения аллотрансплантата печени. Клетки располагаются в один слой,
9 поэтому не нужно дополнительно делать еще тонкие срезы для морфологического исследования клеток печени на наличие или отсутствие соединительной ткани, а также готовить и окрашивать тонкие срезы на определение в них жировых включений и хроматина ядер.
ю

Текст

Смотреть все
(51) 01 33/48 (2006.01) 01 33/576 (2006.01) 61 17/00 (2006.01) 61 10/02 (2006.01) КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ИННОВАЦИОННОМУ ПАТЕНТУ послеоперационном периоде пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени и проведение морфологического исследования срезов биоптатов печени и при обнаружении триады морфологических признаков,включающих воспалительную инфильтрацию по ходу портальных трактов, повреждение желчных протоков и эндотелиит (воспаление вен) диагностирование острого отторжения аллотрансплантата, при этом взятие пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени осуществляют на 7 сутки после трансплантации и для морфологического исследования используют полутонкие срезы биоптата печени полщиной 1 мкм. Морфологическое исследование полутонких срезов (толщина 1 мкм) для диагностики острого отторжения аллотранспланта способствуют более четкому и детальному исследованию биоптата печени и более правильной интерпретации исследуемых изменений для более четкой постановки диагноза острого отторжения аллотрансплантата печени. Клетки располагаются в один слой, поэтому не нужно дополнительно делать еще тонкие срезы для морфологического исследования клеток печени на наличие или отсутствие соединительной ткани, а также готовить и окрашивать тонкие срезы на определение в них жировых включений и хроматина ядер.(72) Эгучи СусумуАрзыкулов Жеткерген АнесовичСейсембаев Манас Ахметжарович Рамазанов Манас ЕмбергеновичНерсесов Александр ВитальевичЕнин Евгений АльбертовичТоксанбаев Данияр СапаровичСадыков Нариман Камильевич(73) Акционерное общество Национальный научный центр хирургии им. А.Н. Сызганова(54) СПОСОБ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ОТТОРЖЕНИЯ АЛЛОТРАНСПЛАНТАТА ПРИ РОДСТВЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ПЕЧЕНИ(57) Изобретение относится к медицине, а именно,к трансплантации органов и тканей и предназначено для диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени. Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени включает взятие в Изобретение относится к медицине, а именно, к трансплантации органов и тканей и предназначено для диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени. В настоящее время аллотрансплантация печени(донором трансплантата печени является генетически и иммунологически отличающийся человеческий организм) является безальтернативным методом хирургического лечения пациентов в терминальной стадии печеночной недостаточности. Криз отторжения - острое отторжение аллотрансплантата печени, определяется как воспаление аллотрансплантата,вызванное генетическими различиями между донором и реципиентом при недостаточном базовом уровне иммуносупрессии, а также у ряда пациентов (2080), несмотря на адекватную иммуносупрессию. Несмотря на хорошую раннюю и удовлетворительную позднюю выживаемость аллотрансплантированной печени,актуальным остается вопрос диагностики различных осложнений, и в первую очередь, острого отторжения трансплантата. Известен способ диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени, включающий проведение клинико-лабораторных исследований в послеоперационном периоде и при определении повышения температуры тела, активного роста уровня аминотрансфераз, увеличения уровня билирубина, лейкоцитоза и эюзинофилии, а также при изменении окраски желчи, выделяемой по Тобразному дренажу диагностируют острое отторжение аллотрансплантата(ЦирюльниковаО.М., Готье С.В. Родственная трансплантация печени /Под ред. Н.А.Мухина // Практическая гепатология. - Москва. - проект МЫ. - 2004. - с.237-244). Недостатком известного способа является то, что все эти данные не могут достоверно свидетельствовать о наличии острого клеточного отторжения аллотрансплантата в послеоперационном периоде, при этом эти изменения могут быть недостаточно проявлены на фоне иммуносупрессии (Цирюльникова О.М.,ГотьеС.В. Родственная трансплантация печени /Под ред. Н.А.Мухина // Практическая гепатология. Москва. - проект МЫ. - 2004. - с. 181-182). Известен способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени, включающий проведение в послеоперационном периоде взятие пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени и проведение его морфологического исследования путем проведения исследования гистологических срезов толщиной 4 мкм и при обнаружении триады морфологических признаков,включающих воспалительную инфильтрацию по ходу портальных трактов,повреждение желчных протоков и эндотелиит(воспаление вен) диагностируют острое отторжение 2 аллотрансплантата (Цирюльникова О.М., Готье С.В. Родственная трансплантация печени /Под ред. Н.А.Мухина // Практическая гепатология. - Москва.- проект МЫ. - 2004. - с.237-244). Недостатком способа является то, что он не предусматривает использование при морфологической диагностике исследование полутонких срезов, которые дают более четкую и детальную контурную картину биоптата печени и более четкую интерпретацию исследуемых изменений для более правильной постановки диагноза острого отторжения аллотрансплантата печени, т.к. для исследования используют полутонкие срезы полщиной 1 мкм, в отличие от обычной гистологии 4 -мкм. Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени включает взятие в послеоперационном периоде пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени и проведение морфологического исследования срезов биоптатов печени и при обнаружении триады морфологических признаков,включающих воспалительную инфильтрацию по ходу портальных трактов, повреждение желчных протоков и эндотелиит (воспаление вен) диагностирование острого отторжения аллотрансплантата, при этом взятие пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени осуществляют на 7 сутки после трансплантации и для морфологического исследования используют полутонкие срезы биоптата печени толщиной 1 мкм. Способ осуществляют следующим образом. Взятие толстоигольного биоптата аллотрансплантированной осуществляют на 7 сутки после проведения трансплантации. Биоптаты после фиксации промывают проточной водой заливают в парафин, предварительно проведя его обезвоживание путем проводки через ряд спиртов возрастающей крепости, далее проводят последовательно пропитку хлороформом, смесью хлороформа с парафином и чистым парафином. Затем готовят полутонкие срезы (толщина 1 мкм) готовят на ультрамикротоме(Австрия). Полутонкие срезы окрашивают метиленовым синим, азуром-2 и основным фуксином (.,., 1974). Исследование гистологических препаратов осуществляют в световом микроскопе с использованием различных объективов (х 10, х 20,х 40, х 100). Пункционный биоптат печени считается адекватным, если в гистологическом срезе имеется 5 или более портальных треугольников. При обнаружении триады морфологических признаков,включающих воспалительную инфильтрацию лимфоцитов по ходу портальных трактов, повреждение просвета желчных протоков и эндотелиит (воспаление вен) (субэндотелиальная инфильтрация лимфоцитами) диагностируют острое отторжение аллотрансплантата. Морфологически классифицируют острое отторжение аллотрансплантированной печени по Банфф-1995. Пример выполнения способа. Пациентка Т.,возраст 33 года. Клинический диагноз Цирроз печени в исходе вирусного гепатитакласс С по Чайлд-Пью. Асцит. Спленомегалия. Варикозное расширение вен пищевода 1 ст. Тромбоцитопения. Морфологический диагноз Хронический гепатит с выраженной активностью патологического процесса по системе рангового счета - индекс фиброза 16 баллов, ИГА (индекс гистологической активности) - 41 балл, цирроз печени 4 стадия, степень фиброза 5 баллов по,А 3 4. Несмотря на проводимое комплексное лечение к моменту операции (трансплантация печени),состояние пациентки было критическим, и прогрессировавшая печеночная недостаточность привела бы ее к неминуемой гибели в ближайшее время. У данной пациентки провели подбор родственного донора. Органным донором для данной пациентки послужила е родная сестра, 38 лет. Трансплантацию было решено проводить после определения биологической совместимости родственного донора и реципиента после иммунологических исследований,таких как определение группы крови, резус фактора крови, а также предшествующих антител и реакции лимфоцитов. У донора и реципиента определена 0(1) группа крови, резус фактор положительный,-реакция лимфоцитов- отрицательная. Визуальным критерием отбора трансплантата явился нормальный цвет печени, отсутствие отека,набухания. Гистологическим критерием пригодности донорского органа - отсутствие признаков тяжелой жировой дистрофии печени. Операция выполнена в условиях общей анестезии и при осуществлении непрерывного мониторинга ЭКГ, ЧСС, пульсооксиметрии и др. Интраоперационно осуществляли антибиотикопрофилактику. Пациентке выполнили стандартную ортотопическую аллотрансплантацию печени после гепатэктомии части печени у родственного донора (правая доля (5-8-й сегменты. Реинфузию печени осуществили после завершения вех венозных анастомозов. Несмотря на адекватную иммуносупрессию на 7 сутки были отмечены клинические признаки острого криза отторжения печеночного трансплантата. В этом случае на 7 сутки диагноз острого отторжения печеночного аллотрансплантата подлежал морфологической верификации, для чего срочно произвели взятие толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени на 7 сутки после трансплантации. Приготовлены полутонкие срезы(толщина 1 мкм). Результаты - в срезах имелось 5 или более портальных треугольников, степень воспаления портальных трактов -1 балл, степень воспаления желчных протоков -2 балла, степень воспаления вен 1 балл. Диагноз - легкое острое отторжение аллотрансплантированной печени. Проведена терапия криза отторжения. Было назначено внутривенное введение метилпреднизолона в дозе 1000 мг/сут. Эффект от проводимой терапии наступил в последующие несколько часов после введения препарата. В течение 2-3 сут вслед за этим нормализовались клинико-лабораторные показатели данной пациентки. При диагностике легкого острого отторжения аллотрансплантата провели повторное иссследование биопсии аллотрансплантированной печени спустя 2 недели. Результат повторного исследования - морфологически острое отторжение аллотрансплантированной печени не диагностировано. Пациентка выписана на 34 сутки в удовлетворительном состоянии под амбулаторное наблюдение. Еженедельное динамическое наблюдение заключалось в регулярном контроле уровня циклоспорина в крови, биохимичеких показателях и УЗИ печени. Больной получал подробную информацию о режиме питания и схеме приема медикаментов. Морфологическое исследование полутонких срезов (толщина 1 мкм) для диагностики острого отторжения аллотранспланта способствуют более четкому и детальному исследованию биоптата печени и более правильной интерпретации исследуемых изменений для более четкой постановки диагноза острого отторжения аллотрансплантата печени. Клетки располагаются в один слой, поэтому не нужно дополнительно делать еще тонкие срезы для морфологического исследования клеток печени на наличие или отсутствие соединительной ткани, а также готовить и окрашивать тонкие срезы на определение в них жировых включений и хроматина ядер. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата при родственной трансплантации печени, включающий взятие в послеоперационном периоде пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени,проведение морфологического исследования срезов биоптатов печени, диагностирование острого отторжения аллотрансплантата при обнаружении триады морфологических признаков в виде воспалительной инфильтрации по ходу портальных трактов,повреждения желчных протоков и эндотелиита,отличающийся тем, что взятие пункционного толстоигольного биоптата аллотрансплантированной печени осуществляют на 7 сутки после транстплантации,а для морфологической диагностики острого отторжения аллотрансплантата исследуют полутонкие срезы биоптата печени толщиной 1 мкм.

ip27086-kzpatents_com.pdf [107,7 Kb] (Жүктеу: 25)

Көру онлайн файл: ip27086-kzpatents_com.pdf

Талқылау
Пікір қалдыру
Пікірлер (0)
Түсініктеме
Кликните на изображение чтобы обновить код, если он неразборчив
Қазақстан Республикасы Ұлттық ғылым академиясы-"Ақпараттық технологиялық орталығы" Қоғамдық қоры